但是，由于細胞因子在體內(nèi)的含量甚微，給細胞因子的檢測帶來困維，細胞因子的檢4.細胞病變抑制法

　　病毒可造成靶細胞的損傷，干擾素等則可抑制病毒所導(dǎo)致的細胞病變，因此可利用細胞病變抑制法檢測這類因子。

　　二、免疫學(xué)檢測法

　　細胞因子均為蛋白或多肽，具有較強的抗原性。隨著重組細胞因子的出現(xiàn)，可較方便地獲得細胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體，因此可利用抗原抗體特異性反應(yīng)的特性，用免疫學(xué)技術(shù)定量檢測細胞因子。盡管細胞因子種類繁多，只要獲得了針對某一因子的特異性抗體，為大規(guī)模檢測臨床病人血清中細胞因子的含量提供了方便。本法僅測定細胞因子的抗原性，與該因子活性不一定相平行，因此要了解細胞因子的生物學(xué)效應(yīng)，必須結(jié)合生物學(xué)檢測法。

　　三、分子生物學(xué)方法

　　這是一類利用細胞因子的基因探針檢測特定細胞因子基因表達的技術(shù)。目前所有*的細胞因子的基因均已克隆化，故能較容易地得到某一細胞因子的cdna探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測細胞因子mrna表達的方法多種多樣，常使用斑點雜交、northern blot、逆轉(zhuǎn)錄pcr，細胞或組織原位雜交等。實驗的關(guān)鍵在于制備高質(zhì)量的核酸探針和獲得合格的待測物標(biāo)記并與目的基因互補的dna區(qū)域段或單鏈dna、rna。根據(jù)其來源可分為cdna探針、寡核核苷酸探針、基因組基因探針及dna探針等。其中cdna探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點雜交及northern blot，而rna探針因穿透性好更適用于原位雜交。核酸探針技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)程序化，以cdna探針為例主要包括：①質(zhì)粒dna的提取;②靶dna區(qū)域段的分離;③靶dna區(qū)域段標(biāo)記;④待測樣品mrna的提取;⑤標(biāo)記cdna探針對待檢樣品的雜交;⑥放射自顯影或顯色分析。近年來出現(xiàn)的rt-pcr檢測特異性mrna的方法也廣泛用于細胞因子研究領(lǐng)域。該法具有靈敏、快速等優(yōu)點，甚至從1～10個細胞中就可檢出其中的特異mrna。